上樣量的定義

在制備純化中，上樣量可以細化為兩類：理論最大上樣量和有效最大上樣量。

理論最大上樣量指的是不考慮任何分離因素的影響，僅僅考慮填料對樣品的承受能力。對于不同種類的色譜填料，因為基質不同，鍵合相不同，分離作用原理不同，造成單位重量的填料對樣品的分離能力也有所差異。例如最常見的裸硅膠填料和C18硅膠填料，鍵合相分別是硅醇基團和C18。通常裸硅膠的理論最大上樣量是硅膠量的1/10， C18硅膠填料的理論最大上樣量是填料量的1/50。

而在實際使用中，樣品的分離度，樣品的溶解度都會影響我們上樣情況。因此實際上我們在日常中提到的分離度更多指的是有效最大上樣量。

分離度和溶解度對上樣量的影響主要決定是否要超載進樣和超載進樣的方式。

首先是分離度，當目標物和雜質分離度很高，可以加大進樣量。隨著進樣量的加大，分離度變小，直到會影響到分離純化收率和純度要求。如果分離度不好就降低上樣量。因此分離度決定是否要采取超載進樣。

其次是溶解度，它決定了超載進樣的方式。樣品溶解性好，則首xuan濃度超載。進樣體積不變，增加樣品濃度，樣品峰從對稱高斯峰形轉變成三角形，峰展寬較小，分離效果好。樣品溶解性差，則選擇體積超載。增加進樣體積，峰高穩(wěn)定，峰形變寬，成平頭峰。但是選擇體積超載會存在樣品析出風險。

如何根據上樣量選擇Flash柱或者

根據已有Flash柱規(guī)格選擇上樣量

各位小伙伴如果無法直接判斷上樣量或選擇柱子規(guī)格，可以選擇月旭WelFlash中低壓制備色譜柱使用說明書中列出的Flash柱規(guī)格和樣品上樣量作為參考。